ГЕНЕТИЧЕСКАЯ ДИФФЕРЕНЦИАЦИЯ КЛОНОВ  L. С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ISSR-МАРКЕРОВ, ПОЛУЧЕННЫХ В КУЛЬТУРЕ

Елена Витальевна Луценко; Василий Александрович Чохели; Алена Вадимовна Верещагина; Михаил Михайлович Середа

Елена Витальевна Луценко
- ФГАОУ ВО «Южный федеральный университет»
Василий Александрович Чохели
- ФГАОУ ВО «Южный федеральный университет»
Алена Вадимовна Верещагина
- ФГАОУ ВО «Южный федеральный университет»
Михаил Михайлович Середа
- ФГАОУ ВО «Южный федеральный университет»

Ключевые слова: Populus tremula L, культура in vitro, микроклональное размножение, экспланты, ISSR-маркеры, полиморфизм

Аннотация

Рассмотрено состояние вопроса в области селекции вида Populustremula L. в Ростовской области. Изложены результаты эксперимента по получению здоровых эксплантов осины методом клонального микроразмножения. Отмечено, что лучше всего стерилизовать образцы в растворе 70 % этанола, затем в 0,1 %-ом растворе сулемы (5 мин.) и последующая отмывка в дистиллированной воде 3 раза по 15 мин. Описана модификация технологии культуры ткани in vitro применительно к древесным видам. Было отмечено, что оптимальной средой для прямой регенерации осины из листовой пластины является среда WPM, содержащая 0,4 мг/л ТДЗ. Мультипликацию побегов производили на среде МС с добавлением 1 мг/л БАП. Укоренение побегов осуществлялось на среде Уайта. Исследована возможность применения ISSR-маркеров для оценки генетического родства клонов осины. Всего было детектировано 16 ISSR-фрагментов, из которых обнаружено 4 уникальных фрагмента, а 9 оказались полиморфными, что составляет 60,1 %.

Литература

1. Козловский Б.Л., Огородникова Т.К., Куропятников М.В., Федоринова О.И. Ассортимент древесных растений для зеленого строительства в Ростовской области. Ростов-н/Д.: ЮФУ, 2009. 416 с.
2. Петрова Г.А. Получение здорового посадочного материала осины (Populus tremula L.) из каллусной ткани с целью оздоровления осинников Республики Татарстан // Учен. записки Казан. гос. акад. ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана. 2011. №. 205. С. 169-173.
3. Плантариум / Открытый атлас сосудистых растений России и сопредельных стран. URL: http://www.plantarium.ru/ page/view/item/46458.html (дата обращения: 23.03.2015).
4. Луценко Е.В. Разработка технологии получения засухоустойчивой формы осины методами клеточной инженерии // Неделя науки, 2015. Ростов-н/Д.: ЮФУ, 2015. C. 8-10.
5. Луценко Е.В., Середа М.М., Лысенко О.Г. Оптимизация микроклонального размножения осины (Populus tremula L.) // Биотехнология. Взгляд в будущее: Сб. тр. 4 Междунар. науч. интернет-конф. 2015. C. 88-92.
6. Михайлов Л.Е. Осина. М.: Агропромиздат, 1985. 72 с.
7. Murashige T., Skoog F. A revised medium for rapid growth and bio assays with tobacco tissue cultures // Physiologiaplantarum. 1962. Vol. 15, N 3. P. 473-497.
8. Peternel Š. et al. In vitro propagation of European aspen (Populus tremula L.) from axillary buds via organogenesis // Scientiahorticulturae. 2009. Vol. 121, N 1. P. 109-112.
9. Cavusoglu A. et al. Direct and indirect plant regeneration from various explants of eastern cottonwood clones (Populus deltoides Bartram ex Marsh.) with tissue culture // African Journal of Biotechnology. 2013. Vol. 10, N 16. P. 3216-3221.
10. Tullus Hardi, Tullus Arvo, Soo Tea, Vares Aivo Hybrid aspen (Populus tremula L. × P. tremuloides Michx.) complex study programme in hemiboreal Estonia // The 23rd Session of IPC. Estonian University of Life Sciences. 2008. P. 183.
11. Lopez-Aljorna A., Bueno M.A., Aguinagalde I., Martґin J.P. Fingerprinting and genetic variability in cork oak (Quercus suber L.) elite trees using ISSR and SSR markers // Ann. For. Sci. 2007. Vol. 64. P. 773-779.
12. Chokheli V., Kozlovsky B., Sereda M., Lysenko V., Fesenko I., Varduny T., Kapralova O., Bondarenko E. Preliminary Comparative Analysis of Phenological Varieties of Quercus robur by ISSR-Markers // J. of Botany. Vol. 2016. Article ID 7910451. 7 pages. 2016. doi:10.1155/2016/7910451.
13. Nei M., Li W.-H. Mathematical model for studying genetic variation in terms of restriction endonucleases // Proct. Natl Acad. Sci. USA. 1979. Vol. 76, N 10. P. 5269-5273.
14. Yap I.V., Nelson R.J. WinBoot A program for performing bootstrap analysis of binary data to determine the confidence limits of UPGMA-based dendrograms - International Rice Research Institute Fhilippines. 1996. 22 p.